[cell biology work] 효소를_이용한_세포분리방법

효소를 이용한 세포분리방법

① 베타딘(10%in PBS) 용액으로 10분간 neonatal foreskin을 소독한다.

② neonatal foreskin에 붙어 있는 지방층을 제거하고, 가위로 foreskin을 chopping한다.

③ 0.5% collagenase와 3mM CaCl2이 첨가된 용액에 chopping된 foreskin을 넣고 37℃ 배양기에서 18hr동안 배양한다.

④ 1×phosphate buffered saline로 5번 세척하고 한번 DMEM media로 세척 한다.

 ⑤ 5×10⁵/100mm 세포를 분주하여 배양 한다.

explant하는 방법

조직을 explant(세포배양용기에 chopping된 조직을 붙여 outgrowth 되는 세포를 취하는 방법도 있음)